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本试剂盒采用碱裂解法裂解菌体,再通过离心吸附柱在高盐状态下特异性地结合溶液中的DNA。离心吸附柱中采用的硅基质材料,能高效、专一吸附DNA。以下操作步骤适用于从1 - 5 mL过夜培养的大肠杆菌LB (Luria-Bertani) 培养液中,快速提取多至20 μg纯净的高拷贝质粒DNA。使用本试剂盒提取的质粒DNA可适用于各种常规生物技术操作,包括酶切、PCR、测序、连接、转化、文库筛选等。
请务必在使用本试剂盒之前阅读如下注意事项
1. 溶液B1使用完毕,请置于2 - 8oC保存。(溶液B1在使用前先加入RNaseA)
2. 第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在溶液W(漂洗液)中加入3倍体积的无水乙醇。(例如向15 mL的漂洗液中加入45 mL的无水乙醇)。
3. 使用前请先检查溶液B2是否出现浑浊的白色结晶。若有白色沉淀物,请置于37℃水浴锅中震荡溶解至完全澄清。
4. 溶液B2和B3用完之后需及时盖紧瓶盖,室温保存。
5. 提取的质粒DNA量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。
质粒小抽试剂盒包括以下组分
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